V. Traitement immédiat des échantillons et chaîne du froid : deux éléments indispensables pour obtenir des résultats de qualité

L’interprétation des bilans de stress oxydant proposés doit reposer impérativement sur un traitement des échantillons sanguins particulièrement soigné. La grande majorité des dosages proposés pour évaluer le stress oxydant sont en effet très sensibles aux conditions de préservation des échantillons (type d’anticoagulant, température, ..). Un exemple en est donné avec la détermination du glutathion réduit et du glutathion oxydé. La figure 25 montre clairement comment évoluent ces deux marqueurs si l’analyse est réalisée 1 heure ou plus après une conservation du sang à température ordinaire. Dans ce cas précis, seules la mise en contact immédiate du sang avec des stabilisateurs et la congélation immédiate des échantillons (T0) permettront d’obtenir une analyse de qualité et interprétable.

figure 25 : évolution du rapport GSH/GSSG dans des échantillons sanguins maintenus entre 1 et 24 heures à température ambiante.

T0 : échantillon traité immédiatement après la prise de sang
Rectangle bleu : intervalle de référence

De façon générale, ces observations sont également valables pour l’ensemble des marqueurs pouvant refléter la présence d’un stress oxydant. La figure 26 montre que la cinétique de conservation des lipoprotéines oxydées (LDL oxydées) est très fluctuante, même dans des échantillons de sang complet conservés à +4°C. La seule condition pour obtenir un résultat fiable est de centrifuger immédiatement l’ échantillon sanguin puis de congeler le plasma à – 20°C.

Figure 26 .

Rappelons que lorsque des scientifiques publient des résultats sur l’évolution de marqueurs plasmatiques du stress oxydant (e.g. la vitamine E), ils sont tenus de préciser dans la partie « matériel et méthodes » de l’article que les échantillons de sang ont été immédiatement centrifugés et que le plasma a ensuite été conservé à –20°C jusqu’au moment de l’analyse du dudit marqueur. PROBIOX SA entend respecter scrupuleusement ces consignes et met donc à la disposition des utilisateurs un protocole très détaillé concernant le prélèvement et le traitement des échantillons sanguins ainsi que leur acheminement sur carboglace dans des boites appropriées vers le laboratoire.